摘要： 为研究柔嫩艾美耳球虫GAM56蛋白的生物学功能，以柔嫩艾美耳球虫广东株配子 体cDNA为模板，克隆该分离虫株的gam56 基因编码序列。构建pET?B2M?GAM56截短表达载 体，利用大肠杆菌表达系统通过IPTG诱导表达GAM56蛋白，纯化后免疫BALB/c小鼠制备 GAM56多克隆抗体。通过间接ELISA和Western blot分析抗体的效价和特异性；收集E. tenella （GD）配子体阶段样品，利用GAM56多克隆抗体进行免疫荧光检测以评价其应用效果。结果显 示：相比E. tenella（Houghton）参考虫株，E. tenella（GD）的gam56 基因存在末端部分片段的缺 失，CDS序列1 077 bp，可编码358个氨基酸；预测蛋白大小41.3 kDa。GAM56保守区域截短原 核表达蛋白主要以包涵体形式存在。间接免疫荧光分析显示该抗体能够特异性识别配子体阶 段的GAM56蛋白。该研究为进一步解析柔嫩艾美耳球虫广东株GAM56生物学功能提供了材 料，为艾美耳球虫有性发育相关蛋白的功能研究与机制解析奠定基础。

关键词: 柔嫩艾美耳球虫；GAM56；原核表达；多克隆抗体