广东畜牧兽医科技 ›› 2025, Vol. 50 ›› Issue (4): 83-93.DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2025.04.14

• • 上一篇    

新型鹅星状病毒基因1型和2型双重荧光定量PCR方法的建立及应用

徐杭1#,刘梦凡1#,尹政浩1#,陆泳锟1,李雨泽1,罗浩健1,林俊杰1,王一侨1,刘莹莹1,梅堃1*,黄淑坚1,2*   

  1. (1. 佛山大学动物科技学院,广东佛山528000;2. 广东省华晟生物技术有限公司,广东广州510000)
  • 出版日期:2025-08-18 发布日期:2025-08-18
  • 通讯作者: 梅堃,黄淑坚
  • 基金资助:
    广州市增城区创业领军团队项目(No.202101001);佛山市生物检测工程技术研究中心

  • Online:2025-08-18 Published:2025-08-18

摘要: 为建立一种行之有效地检测新型鹅星状病毒(Novel Goose Astrovirus,NGAstV)基因 1型(NGAstV?1)和基因2型(NGAstV?2)双重荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reac? tion,qPCR),该研究根据NGAstV?1 和NGAstV?2 的ORF2 蛋白设计鉴定引物,建立SYBR Green I的双重qPCR检测方法并用36份疑似感染NGAstV?1和NGAstV?2的雏鹅肝及肾组织样 品进行评估。试验结果显示qPCR相关系数为0.997,对鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DT? MUV)、番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)、新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovi? rus,NDRV)、禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)、禽腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)、鹅细小 病毒(goose parvovirus,GPV)扩增结果均为阴性;最低检测限度为1.12×101 copies/μL;重复性试 验结果显示:组间变异系数小于0.8%,组内变异系数小于0.5%,具有良好重复性。由此可知, 该qPCR可高效、特异地检测NGAstV?1和NGAstV?2,为NGAstV监控提供切实可行的方法。

关键词: 新型鹅星状病毒;qPCR;ORF2

中图分类号: