摘要: 为建立一种行之有效地检测新型鹅星状病毒(Novel Goose Astrovirus,NGAstV)基因 1型(NGAstV?1)和基因2型(NGAstV?2)双重荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reac? tion,qPCR),该研究根据NGAstV?1 和NGAstV?2 的ORF2 蛋白设计鉴定引物,建立SYBR Green I的双重qPCR检测方法并用36份疑似感染NGAstV?1和NGAstV?2的雏鹅肝及肾组织样 品进行评估。试验结果显示qPCR相关系数为0.997,对鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DT? MUV)、番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)、新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovi? rus,NDRV)、禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)、禽腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)、鹅细小 病毒(goose parvovirus,GPV)扩增结果均为阴性;最低检测限度为1.12×101 copies/μL;重复性试 验结果显示:组间变异系数小于0.8%,组内变异系数小于0.5%,具有良好重复性。由此可知, 该qPCR可高效、特异地检测NGAstV?1和NGAstV?2,为NGAstV监控提供切实可行的方法。
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