广东畜牧兽医科技 ›› 2025, Vol. 50 ›› Issue (6): 41-48.DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2025.06.07

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不同冻存体系冷冻保存鸡原始生殖细胞(PGCs)的比较研究

孙晟睿1,2,朱颖1,赵浩毅1,何燕华1,赵智锋1,罗成龙1,舒鼎铭1,2,邹娴1*   

  1. (1.广东省农业科学院动物科学研究所&猪禽种业全国重点实验室&广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广东广州,510640;2.华中农业大学,湖北武汉430000))
  • 出版日期:2025-12-18 发布日期:2025-12-18
  • 通讯作者: 邹娴
  • 基金资助:
    广东省重点研发计划(2022B0202110002)、广东农科院科技创新战略(农业科研主力军建设)专项(R2023PY?JX016)、猪禽种业全国重点实验室PI任务书(GDNKY?ZQQZ?K11)

  • Online:2025-12-18 Published:2025-12-18

摘要: 为寻找鸡原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)的最佳冻存方案,选择近年来 文献中提到的以及市面上流通的八种冻存液,使用相同处理方法对相同培养条件的两种细胞 量进行冻存。复苏后通过台盼蓝计数法、CCK8?细胞增殖试验和细胞凋亡试验检测各组的细胞 量和细胞状态,来对八种冻存液在两个细胞量中的表现进行评价。结果表明:Ⅶ号冻存液在 1.37×106 cells/mL细胞量中的活细胞回收数最高,达到1.14×106个,且异硫氰酸荧光素(FITC) 和碘化丙啶(PI)均阴性的细胞达到74.8%;Ⅰ号冻存液在2.75×106 cells/mL细胞量中的活细胞 回收数最高,达到2.60×106个,FITC和PI均阴性的细胞达到75.2%。而Ⅱ号和Ⅷ号冻存液效果 最差。试验可以得出结论:不同的冻存液在不同细胞量中表现的冻存效果不同。在250 μL 冻 存液中,最适合1.37×106 cells/mL PGCs的是Ⅶ号冻存液(赛存生物冻存液);最适合2.75×106 cells/mL PGCs的是Ⅰ号冻存液(基础培养基∶鸡血清∶DMSO∶CaCl2=81.25%∶10%∶8%∶0.75%)。

关键词: 鸡, 原始生殖细胞, 冷冻保存, 家禽保种

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