摘要： 新城疫、禽传染性支气管炎与禽流感是可引起禽类呼吸道症状相似的三种急性传染病，且存在混合感染。为建立新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重 RT?qPCR 检测方法，该研究对比了 GenBank 登录的新城疫病毒（NDV）L 基因、禽传染性支气管炎病毒 （IBV）1a 基因和禽流感病毒（AIV）NP 基因，经分析选取保守序列设计了三套引物与探针，通过 优化检测方法的反应体系，成功建立了可同时检测 NDV、IBV 和 AIV 的三重 RT?qPCR 方法，并 对其特异性、敏感性和重复性进行了评估。结果表明，该方法能够特异性检测出 NDV、IBV 和 AIV，有较好的特异性；方法对三种病毒的最低检测限均为 3.02×102copies/μL，有较高的敏感 性；重复性实验结果显示批内与批间变异系数均不大于 1.28%，有良好的重复性。使用本研究 建立的方法对 102 份临床咽拭子进行检测，并与常规 RT?PCR 进行比较，总符合率为 96.6%。 本研究建立的三重 RT?qPCR 检测方法，特异性强，灵敏度高，可用于 NDV、IBV、AIV 三种病毒 的检测。

关键词: 新城疫病毒；禽传染性支气管炎病毒；禽流感病毒；荧光 RT?PCR

中图分类号: 

• S852.65