广东畜牧兽医科技 ›› 2025, Vol. 50 ›› Issue (3): 96-104.DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2025.03.14

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经典型和新型鹅呼肠孤病毒的双重RT⁃qPCR 检测方法的建立和应用

尹政浩1#,魏无缺1#,梁昭平3,李雨泽1,徐杭1,陆泳锟1,梅堃1*,黄淑坚1,2*   

  1. (1.佛山大学动物科技学院,广东佛山528000;2.广东省华晟生物技术有限公司,广东广州510000;3.华南农业大学兽医学院,广东广州510000)
  • 出版日期:2025-06-18 发布日期:2025-06-18
  • 通讯作者: 梅堃,黄淑坚
  • 基金资助:
    广州市增城区创业领军团队项目(No.202101001);佛山市生物检测工程技术研究中心

  • Online:2025-06-18 Published:2025-06-18

摘要: 鹅呼肠孤病毒(Goose reovirus, GRV)包括经典型(GRV)和新型鹅呼肠孤病毒(Novel Goose reovirus, NGRV),两者在流行病学特征和病毒基因序列上存在差异。目前针对这两种类 型病毒的敏感、特异的检测方法尚未完善,使得准确诊断和及时干预变得十分困难。为了区分 GRV和NGRV,建立了一种基于染料法(SYBR Green I)的双重RT?qPCR检测方法。结果显示: 该方法通过熔解曲线可区分GRV(79.5℃)和NGRV(86.5℃),对常见的水禽流行疫病均未出现 扩增,最低检出为6.466×101拷贝/μLGRV和4.979×101拷贝/μLNGRV,组内与组间变异系数均 小于0.55%。结果表明,这个研究所建立基于染料法的双重RT?qPCR检测方法可以快速准确 地确定感染鹅群中不同型的GRV,为疾病的早期诊断、流行病学监测和有效防控提供支持。

关键词: 鹅呼肠孤病毒;GRV和NGRV;染料法;RT?qRCR;熔解曲线

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