广东畜牧兽医科技 ›› 2021, Vol. 46 ›› Issue (3): 69-73.

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鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白原核表达载体的构建

刘云霞,仇微红,叶贺佳,梁昭平   

  1. (1.广州市华南农大生物药品有限公司,广东 广州511300; 2.华南农业大学,广东 广州 510642)
  • 出版日期:2021-06-18 发布日期:2021-06-18
  • 通讯作者: 梁昭平

  • Online:2021-06-18 Published:2021-06-18

摘要: 本研究旨在构建鸡传染性支气管炎病毒(IBV)原核表达体系,制备其S1目的蛋白, 为建立IBV ELISA检测方法奠定基础。以IBV QX型基因为模板,PCR扩增出S1蛋白基因,连 接至pET?32a原核表达载体,获得重组质粒pET(32a)?S1,将重组质粒转入大肠杆菌BL21感受 态细胞后进行IPTG诱导表达。SDS?PAGE分析结果表明,重组S1蛋白在大肠杆菌BL21中获得 表达,分子量约为60 kDa。Western? blot分析表明,重组蛋白能与Anti?His标签抗体发生特异 性反应。利用Kcl染色法,成功纯化S1目的蛋白。本研究成功构建了pET(32a)?S1重组原核表 达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,为进一步制备S1蛋白抗体奠定了基础。

关键词: 鸡传染性支气管炎病毒; 原核表达; S1蛋白; 蛋白纯化

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