广东畜牧兽医科技 ›› 2020, Vol. 45 ›› Issue (5): 48-52.

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血清4型禽腺病毒TaqMan 荧光定量PCR 方法的建立及初步应用

招丽婵,王占新,罗洋洋,林欣,鲁俊鹏**   

  1. (广东温氏食品集团股份有限公司,广东省畜禽健康养殖与环境控制企业重点实验室,广东温 氏食品集团股份有限公司研究院,广东 云浮 527400)
  • 出版日期:2020-10-18 发布日期:2020-10-18
  • 通讯作者: 鲁俊鹏

  • Online:2020-10-18 Published:2020-10-18

摘要: 根据多个GenBank登录的血清4型禽腺病毒株hexon基因序列,经多序列比对分析 选取高度保守区域设计特异性引物探针,建立了检测FADV?4的TaqMan 荧光定量PCR方法。 该方法扩增产物长度为71 bp,在101~107 copies/μL范围内具有良好的线性关系,其扩增相关 系数为0.995,初始模板最低检测下限为7.3×101 copies/μL质粒DNA,与常规PCR相比灵敏度 高约1000倍。以H9亚型流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管病毒、传染性法氏囊病毒、网状 内皮增生病毒、白血病病毒、减蛋综合征病毒、传染性贫血病毒核酸为模板时,均检测不到荧光 信号,批内和批间重复性试验变异系数均不超过2%,具有良好的特异性和重复性。本文建立 的方法可为FADV?4的早期感染诊断及定量分析提供有效技术手段。

关键词: 血清4型禽腺病毒; TaqMan荧光定量PCR

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