摘要： 为了提升犬脂肪间充质干细胞（cADMSCs）的扩增效率并解决传统二维培养体系规 模化生产的局限性，试验采用基于SynthemaxⅡ微载体的三维悬浮培养技术，通过静态与动态 培养策略优化接种密度、搅拌模式和培养周期等关键参数。研究通过静态培养对比不同接种 密度（1×104、2×104、3×104 cells/cm2）对扩增效率和细胞活率的影响，采用台盼蓝染色计数活细 胞并计算扩增倍数；动态培养中对比间歇搅拌与间歇?持续搅拌模式对细胞增殖的影响，利用 转瓶生物反应器结合葡萄糖代谢监测评估扩增效果；通过荧光染色（Calcein?AM/PI、TRITC?鬼 笔环肽/DAPI）检测细胞活性及形态特征，并分析不同培养周期（24-120 h）的细胞扩增趋势与 活率变化。结果表明：静态培养下，接种密度为2×104 cells/cm2时扩增倍数达（7.20±0.20）倍，活 细胞率为96.4%；动态培养采用间歇搅拌24 h后转为持续搅拌72 h的模式，在300 cm2微载体上 实现4.1×104个细胞扩增，扩增倍数达（6.70±0.20）倍，活细胞率为94.0%；培养周期优化显示， 96 h为最佳培养时间，此时细胞形态完整且未出现聚集脱落，活率稳定在94.0%。说明基于微 载体的三维悬浮培养体系通过优化接种密度、分阶段搅拌策略及培养周期，显著提升了cAD? MSCs的扩增效率与质量，为规模化生产提供了可行方案。
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