参考 GenBank 上已发表的产蛋下降综合征病毒（EDSV）五邻体（penton）基因序列、H9 亚型禽流 感病毒的 HA 基因和鸭坦布苏病毒（DTMUV）E 基因序列，分别设计了检测 EDSV、H9 AIV 和 DTMUV 的特异性引物， 扩增目的片段大小分别为 110bp、281bp 和 266bp。通过 PCR 验证及引物浓度的优化，建立了针对这 3 种病毒的 三重荧光 PCR 检测方法。特异性试验结果表明，该方法可以同时检测 EDSV、H9 AIV 和 DTMUV，且不与鸭瘟病毒、 鹅细小病毒、番鸭细小病毒和大肠杆菌基因组 DNA 以及鸭甲肝病毒 1 型、鸭甲肝病毒 3 型、番鸭呼肠孤病毒和 新城疫病毒的RNA发生交叉反应；敏感性试验表明，该方法对EDSV、H9 AIV和DTMUV核酸的检测下限分别为8.0、4.8 和1.3 个拷贝，该方法比常规 PCR 方法敏感 10 倍；该方法重复性良好，对不同批次的样品扩增效果良好。通过 标准曲线的建立以及临床样品的检测表明，该方法可以用于 EDSV、H9 AIV 和 DTMUV 的定性和定量检测。