广东畜牧兽医科技 ›› 2023, Vol. 48 ›› Issue (2): 74-80.DOI: 10.19978/j.cnki.xmsy.2023.02.14
薛少华1,2 ,吕紫欣1,2 ,张鑫杰1,2 ,戴爱玲1,2 ,杨小燕1,2 ,俞国华1,2*
XUE Shaohua1,2,LÜ Zixin1,2,ZHANG Xinjie1,2,DAI Ailing1,2,YANG Xiaoyan1,2,YU Guohua1,2*
摘要: 为了比较《中国药典》已收录但相当耗时的液体培养法和未收录但相对快速的荧光 定量PCR(qPCR)法对支原体检测的灵敏度,试验分别在猪鼻支原体生长的对数期(48 h)、稳定 期(96 h)和衰亡期(144 h)取样,将样品10倍系列稀释后,使用液体培养法和qPCR法对各个 稀释度进行检测(两种方法的样品加入体积分别为0.5 mL和5 μL),以比较二者的灵敏度。结 果显示:在存活支原体占比高的对数期和稳定期,液体培养法比qPCR法的检测灵敏度高约100 倍;而在死亡支原体占比大幅增加的衰亡期,结果则相反,qPCR法反而比液体培养法的检测灵 敏度高约1 000倍。当把对数期样品高速离心浓缩约100倍后再用qPCR法检测,其检测灵敏 度比浓缩之前提高了约100倍。上述结果表明:影响液体培养法和qPCR法相对灵敏度的主要 因素是各自体系中不同的样品加入体积和样品中存活支原体的比例,而由于前一因素导致的 两种方法灵敏度的差异,可以通过高速离心浓缩的方法缩小,使两种方法的相对灵敏度基本 相同。
中图分类号: