广东畜牧兽医科技 ›› 2021, Vol. 46 ›› Issue (3): 88-91.

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鸭甲肝病毒1型和3型HRM检测方法的建立

董嘉文,李林林,张俊勤,黄允真,孙敏华*   

  1. (1. 广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室, 农业农村部兽药与诊断学科群广东科学观测实验站,广东 广州 510640; 2. 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心,广东 茂名 525000)
  • 出版日期:2021-06-18 发布日期:2021-06-18
  • 通讯作者: 孙敏华
  • 基金资助:
    科技创新战略专项资金(高水平农科院建设)(202110TD,R2020PY?JC001,R2020PY?JX014,R2020QD?049,R2018QD?093),江 门市科技计划项目(DZX20192520301,2020030103310009038),梅州市科技计划项目(2020A0104004)

  • Online:2021-06-18 Published:2021-06-18

摘要: 本研究根据鸭甲肝病毒1型(DHAV?1)和3型(DHAV?3)的5′UTR基因的保守区域, 设计了1对特异性的引物,扩增目的片段大小约为199 bp。通过优化反应条件,建立了基于高 分辨率熔解曲线(HRM)分析的鸭甲肝病毒1型和鸭甲肝病毒3型的鉴别检测方法。特异性试 验结果表明,该方法能特异性地检测出DHAV?1和DHAV?3,检测其它常见鸭源病毒不能形成 特异性的熔解峰;敏感性和重复性试验表明,对p?DHAV?1和p?DHAV?3阳性质粒的最低检测 限分别为220 copies 和28 copies,对不同批次的样品扩增效果良好,具有良好的批内和批间重 复性。采用该方法检测临床样品,与传统的二重PCR 方法比较,符合率为100%。该方法为 DHAV?1和DHAV?3的临床疑似病例的鉴别检测、快速诊断以及分子流行病学调查等提供了技 术支撑。

关键词: 鸭甲肝病毒1型; 鸭甲肝病毒3型; HRM

中图分类号: